SepMateでのPBMC分離のポイントを教えてください。
SepMateの使用方法や注意点につきましては、以下の使用説明書をご確認ください。
Product Information Sheet: SepMate (stemcell.com)
比重液の温度にご注意
比重液は温度によって比重が変わりますので、SepMateでご使用される比重液の温度にご注意ください。
比重液を冷蔵庫で保管していた場合、取り出してからすぐに使用すると、比重が変わり分離がうまくいかないことがあります。
赤血球のコンタミネーションにご注意
赤血球のコンタミネーションを防ぐために下記の点にご留意ください。
1.デカンテーション操作の動作を以下の動画にあるような形でスムーズにおこなう。
(デカンテーション操作では3秒前後で傾けていただくことをお勧めしております。気泡が下のチェンバーに入ると赤血球の層が出てきます)
How to Isolate PBMCs from Whole Blood Using the SepMate™ PBMC Isolation Tubes: 15-Minute Protocol | STEMCELL Technologies
2.比重遠心時にバランサーの重さを1g単位まで合わせる
(遠心分離の際にバランサーの重量がサンプルと異なっていると振動が発生し、比重液層と上清が混ざってしまいます。特にSepMateはプラスチックのパーツの分、影響が出るので注意が必要です。2 g単位の差でも結果に影響が出ることがございますので、遠心前にバランサーの調整をお願い致します。
3.血液を穏やかにいれること
壁面を伝わせながら穏やかに血液をお入れください。
こちらのリンクも参照ください。
―細胞分離を成功させるために「SepMateの場合」